免疫检查点抑制剂（ICIs）的问世革新了癌症治疗，但仍有大量患者对治疗无响应，核心症结在于两类难题：

1.肿瘤特异性T细胞匮乏：多数实体瘤（如胰腺癌、卵巢癌、胶质母细胞瘤）突变负荷低、新抗原不足，导致能识别肿瘤的特异性T细胞数量稀少，ICIs难以发挥作用；

2.免疫微环境抑制严重：肿瘤相关巨噬细胞等髓系细胞高表达PDL1等免疫检查点分子，释放抑制性因子，即便肿瘤中存在大量"旁观者T细胞"（非肿瘤特异性 T 细胞），其杀伤功能也被严重禁锢。

此前获批的双特异性T细胞衔接器（Bi-TCE）虽能激活旁观者T细胞，但无法破解免疫抑制微环境，在实体瘤中的疗效受限。狄文教授团队针对这一痛点，提出"激活T细胞+重塑微环境" 的双效治疗思路，研发出兼具三重靶向功能的新型抗体。

图1：免疫惰性肿瘤微环境中潜在功能性T细胞的存在

团队基于自主搭建的TROY-Ig抗体平台，成功构建B7H3xCD3xPDL1三特异性抗体，其结构设计精准适配治疗需求：

✿双Fab臂靶向泛癌抗原B7H3：确保肿瘤特异性结合，避免脱靶效应；

✿低亲和力CD3结合域：温和激活T细胞（包括旁观者T细胞），减少系统性免疫激活风险；

✿PDL1结合域：既是免疫检查点阻断剂，又是免疫细胞间的"桥梁分子"，介导T细胞与髓系细胞的功能性互作。

图2：双特异性/三特异性T细胞衔接器在多种原代人体系统中的疗效评估

1.精准激活T细胞：抗体同时结合肿瘤细胞B7H3和T细胞CD3，构建"免疫突触"，将原本无肿瘤识别能力的旁观者T细胞转化为细胞毒性T细胞，释放穿孔素、颗粒酶直接裂解肿瘤；

2.巨噬细胞重编程：激活的T细胞分泌IFNγ，诱导免疫抑制性巨噬细胞重编程为免疫刺激表型，高表达IL-15等促免疫因子；

3.功能持续放大：IL-15进一步促进T细胞增殖、分化为效应记忆T细胞，同时IFNγ上调巨噬细胞PDL1表达，招募更多免疫细胞进入环路，形成"激活-分泌-再激活" 的正反馈，实现"以少胜多"的抗肿瘤效应。

◆共培养体系中，B7H3xCD3xPDL1的半数有效浓度（EC50）仅为双特异性抗体的1/7（94.5 ng/ml vs 691.5 ng/ml），在卵巢癌细胞系 SKOV3 中实现近完全清除；

◆涵盖卵巢癌、结直肠癌、非小细胞肺癌、膀胱癌等21例患者来源肿瘤悬液（PDTS）中，抗体显著提升CD8⁺T细胞激活标志物（CD25）、增殖标志物（Ki67）及细胞因子（IFNγ、TNF）表达，肿瘤杀伤率较双特异性抗体提升2-3倍；

◆患者来源肿瘤片段（PDTF）模型中（保留肿瘤原位微环境），功能T细胞（CD3⁺GZMB⁺）浸润量增加3倍，肿瘤细胞占比降低40%，T 细胞与肿瘤细胞平均距离从150μm 缩短至50μm。

在植入SKOV3卵巢癌细胞的人源化NOG小鼠中：

◆B7H3xCD3xPDL1治疗组肿瘤体积较对照组缩小90%以上，近半数小鼠实现完全肿瘤清除，而双特异性抗体组仅轻度抑制肿瘤生长；

◆治疗后小鼠体重稳定，肝肾功能指标正常，无明显器官毒性，也未出现严重移植物抗宿主病（GVHD）；

◆在A375黑色素瘤、Detroit 562头颈部鳞癌等模型中，抗体均展现强效抗肿瘤效果，验证了跨癌种适用性。

◆替换靶向抗原后，团队构建的HER2xCD3xPDL1、CEAxCD3xPDL1抗体同样能有效激活T细胞，抑制对应抗原阳性肿瘤生长，证明平台的通用性；

◆基于33例患者样本的转录组数据和体外药效结果，团队训练机器学习预测模型，通过识别特定免疫细胞状态（如CD8⁺细胞毒性T细胞、记忆T细胞丰度），预测患者响应率的AUC达0.94，可为临床精准筛选患者提供工具。

西班牙知名免疫学家Pedro Berraondo等在同期述评中指出，该研究以三特异性抗体创造性整合肿瘤识别与髓系细胞调控，提出了突破实体瘤免疫抑制的全新工程化范式，凸显其在下一代肿瘤免疫治疗中的重要地位。

➱这项研究的核心意义在于：

1.破解"冷肿瘤" 治疗瓶颈：首次实现旁观者T细胞激活与免疫微环境重塑的协同作用，为缺乏肿瘤特异性T细胞的实体瘤提供有效治疗策略；

2.提升治疗安全性与有效性：低亲和力CD3结合域设计减少脱靶效应，局部正反馈环路避免系统性细胞因子风暴，临床转化潜力高；

3.推动精准免疫治疗：建立的机器学习模型可快速筛选获益患者，避免无效治疗，降低医疗负担。