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建立人阴道黏膜干细胞构建人工阴道的动物模型研究

2012-08-29 10:42 来源: 中国妇产科网 作者: 翁慧男 王沂峰 刘风华 浏览量: 2995

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【摘要】
目的:体外分离、培养人阴道黏膜干细胞( vaginal mucosa stem cells VMSCs) ,并种植于人羊膜上,以此为支架构建人工阴道的小鼠模型,为进一步用患者自体的VMSCs治疗先天性无阴道疾病奠定基础。
方法:采用2004210 - 2005207于广州医学院附属广州市第二人民医院妇科行阴道整形手术中取得的人阴道黏膜标本共5例,用胰酶、胶原酶混合消化法可获得阴道黏膜细胞。20min内粘附于Ⅳ型胶原的阴道黏膜细胞为VMSCs,种植于人羊膜上1周,移植入事先去除阴道黏膜的裸鼠体内。
结果:所筛选的VMSCs与原代人阴道黏膜细胞的G0 /G1细胞比例、CK19、CK10阳性细胞比例差异均有统计学意义, P < 0105。移植入裸鼠体内第42天,广谱抗人CK及HE染色均显示VMSCs形成复层鳞状上皮。
结论:Ⅳ型胶原快速粘附法可有效筛选VMSCs,它以人羊膜为支架移植入裸鼠体内第42天可构建出类似正常阴道的复层鳞状上皮。

【关键词】 阴道黏膜;干细胞;细胞培养;先天性无阴道;动物模型

 先天性无阴道系胚胎时期生殖器官发育异常所致,目前多采用手术治疗,术式多达20余种,但或多或少存在缺陷,部分术式创伤大、所构建的人工阴道干燥、有异味、性生活不满意等对患者夫妻双方身心均造成不良的影响。因此,创建一种副反应小、创伤少、比较符合生理要求的新型阴道成形术成为治疗先天性无阴道疾病的目标。
  成体干细胞在体内终生存在,具有多能性及可塑性,可取代因衰老、创伤或疾病而损伤的组织。目前国内外学者在人类或啮齿类等动物的皮肤、毛囊、角膜、肠道黏膜等上皮组织中成功分离出干细胞,并在应用于组织创伤修复的实验中取得了令人瞩目的成效[ 1 - 7 ]。阴道黏膜上皮属于非角化的复层鳞状上皮,终生处于不断的更新状态,因此有理由推断阴道黏膜也应存在黏膜干细胞(VMSCs) 。VMSCs属于成体干细胞的一种,具有强大的增殖能力,具有维持阴道黏膜上皮细胞再生和修复的重要功能。因此,分离富集患者自身的VMSCs为种子细胞,创建一种新型的阴道成形术,有可能达到副反应少、创伤小、更符合生理要求的目标。


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